血细胞计数板用于人体内红细胞和白细胞的显微计数，也常用于细菌、真菌、酵母菌等一些微生物的计数。它是一种常见的生物工具。
采用优质厚玻璃制成。每个计数板被一个H形槽分成两个相同的计数池。计数池两侧有支撑柱，其上覆盖有特制的盖玻片，形成高0.10 mm的计数池，计数池上画有长3.0mm、宽3.0mm的正方形，分成9个大方块，每个大方块的面积为1.0mm×1.0mm = 1.0 mm2；体积为1.0mm2 x 0.1mm = 0.1mm3..其中，中央大正方形用双线分割成25个中间正方形，中央和四角的5个中间正方形为红细胞计数区(图中浅红色区域)，每个中间正方形用单线分割成16个小正方形。四角的四个大方块是白细胞计数区(图中浅蓝色区域)，每个大方块用一条线分成16个中间方块。根据国际标准局(NBS)的规定，大正方形每边长度的允许误差为1%。
2.25× 16细胞计数板的使用
3.将菌悬液摇匀，用滴管吸一点，沿盖玻片下缘从计数板中间平台两侧的凹槽中滴一小滴(不要太多)，使菌悬液以液体的表面张力充满计数区，避免产生气泡，用吸水纸吸干凹槽中流出的多余菌悬液。也可以将菌悬液直接滴在计数区上(不要让计数区两侧的平台接触到菌悬液，以免盖好盖玻片后增加计数区的深度)，然后盖上盖玻片(不要产生气泡)。
静置一段时间，使细胞沉淀在计数板上，不再随液体漂移。将血细胞计数板放在显微镜的载物台上，并夹紧。先找到低倍镜头下的计数区域，再切换到高倍镜头进行观察计数。因为活细胞的折射率和水的折射率差不多，所以在观察时要减弱光的强度。计数时，如果计数区域由16个中间方块组成，则在左上、左下、右上、右下方向的四个中间方块(即100个小方块)中计数细菌数。如果是由25个方块组成的计数区域，除了上面的四个中国边，还需要计算中心方块(即80个小方块)的细菌数量。为了保证计数的准确性，避免重复计数和遗漏，计数时对落在网格上的细胞的统计应有统一的规定。如果细菌位于大网格的双线上，则数上面的线而不是下面的线，数左边的线而不是右边的线，以减少误差。即位于该网格的上一行和左一行的单元格在该网格中计数，位于该网格的下一行和右一行的单元格按规定在相应的网格中计数。见右图:即此单元格中有3个计数单元格。对于芽殖酵母，当芽达到母细胞的一半大时，可以算作两个菌体。对每个样本重复计数2-3次(每次之间的差值不能太大，否则要重新操作)，根据公式计算每毫升(g)菌悬液的细胞数。计数完毕后，取下盖玻片，用水冲洗血细胞计数板，不要用硬物清洗或擦拭，以免损坏格尺。清洗后，自己或用吹风机吹干，放在盒子里保存。
冀州傅氏张
将培养液吸出试管进行计数前，应轻轻摇动试管几次，使酵母均匀分布。
制作:首先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取盖玻片边缘的培养液滴，让培养液自行浸润。
所有的酵母沉淀到底部后，用显微镜观察它们。
压在小方块边界上的酵母要跟着，左右不算。
1mL培养基中的细胞数=(五个方块中的细胞总数/五个方块中的小方块数)* 400 * 10 ^ 4 *稀释倍数。
评论列表